

專家級超薄切片技術(shù),精準洞察和優(yōu)異性能

說到超薄切片技術(shù),很少有人能像Helmut Gnaegi這樣舉足輕重。作為金剛石切片刀公司Diatome的聯(lián)合創(chuàng)始人,Helmut花了數(shù)十年時間完善切片的藝術(shù)和科學。在這次專訪中,他分享了自己在聚合物切片方面的深厚專業(yè)知識——從刀具幾何形狀的細微差別到低溫技術(shù)的挑戰(zhàn)。無論您是經(jīng)驗豐富的顯微鏡專家,還是剛剛起步,Helmut的見解都能為您提供實用的指導和靈感,幫助您實現(xiàn)切割。
主要經(jīng)驗:
超薄切片確保結(jié)構(gòu)完整性——是制作高質(zhì)量、無損傷聚合物切片的理想選擇。
低溫切片需要精準的操作——需要專用工具技術(shù)。
正確的樣品固定方法至關(guān)重要——可防止樣品變形并保持材料特性。
切片刀的選擇必須與應用相匹配——使用針對低溫或室溫條件選擇合適的切片刀。
精確修塊是基礎——實現(xiàn)干凈、一致的切片條帶。
根據(jù)應用目的選擇方法——根據(jù)成像目標(表面結(jié)構(gòu)與內(nèi)部結(jié)構(gòu))定制方法。
切刀片背后故事:Helmut Gn?gi對聚合物超薄切片的專業(yè)見解——Diatome

Helmut Gn?gi是世界上尤其值得信賴的金剛石切片刀公司之一的聯(lián)合創(chuàng)始人,他花了幾十年時間打磨超薄切片技術(shù)。我們與他坐在一起,從切片刀的幾何形狀到低溫挑戰(zhàn),了解聚合物切片的微妙之處。
您是如何進入超薄切片領(lǐng)域的?
Helmut Gn?gi:我最初是一名機械工程師,但后來迷上了超薄切片技術(shù)。我們早期制造的都是手動拋光機,我看到了可以改進的地方。那時,像 Fernández-Morán這樣的研究人員需要大腦切片用于TEM觀察。這一挑戰(zhàn)成為我畢生的事業(yè)。
如今,人們?yōu)槭裁词褂贸∏衅夹g(shù),而不是FIB或低溫等離子或其他技術(shù)?
Helmut Gn?gi:超薄切片仍然是獲得高質(zhì)量聚合物切片的最干凈的方法。FIB和等離子方法會造成損傷--高溫、離子和變形。而超薄切片則能保持材料的特性,特別是對于精細或多層聚合物。
重要見解
超薄切片技術(shù)可提供無損傷、薄而光滑的切片,是TEM、AFM和表面敏感技術(shù)(如原子力顯微鏡)的理想之選。詳見徠卡顯微系統(tǒng)公司最新推出的超薄切片機UC Enuity。
室溫和低溫下聚合物切片的主要區(qū)別是什么?
Helmut Gn?gi:在室溫下,切片是漂浮的——你可以看到它們,也很容易拿起它們。而在低溫下,情況就不同了。它們?nèi)菀拙砬y處理。你需要技巧和合適的工具,比如用睫毛來壓平或引導它們。

聚合物在切片前應如何固定?有什么技巧嗎?
Helmut Gn?gi:正確的固定方式非常重要。如果樣品彎曲,結(jié)構(gòu)可能會發(fā)生變化。在進行超薄切片之前,應小心修剪聚苯乙烯等易碎聚合物。對于薄的聚合物薄膜,我一直建議使用凝膠將其夾在金屬框架之間。對于精細的低溫樣品,OCT效果很好,但不要讓它影響成像。
在聚合物切片時,人們最容易犯的錯誤是什么?
Helmut Gn?gi: 他們用錯了刀,或者刀已經(jīng)不鋒利了。并不是所有的金剛石切片刀性能都一樣,尤其是在低溫條件下。有些金剛石切片刀是為了切割包埋樹脂而制造的,而不是進行干切。此外,修塊也經(jīng)常被省略或做得不好。
提示:始終根據(jù)切片條件(低溫與常溫)選擇合適的刀具類型,并確保精確修塊,以獲得干凈的切片條帶。
對于聚合物切片新手,您最大的建議是什么?
Helmut Gn?gi:了解您要切割的是什么,為什么要切割。是為了表面成像?內(nèi)部結(jié)構(gòu)?每種用途都需要不同的設置,而且要始終尊重切片刀。不了解應用,就無法制造出好的切片刀。
專家提示
避免彎曲堅硬的聚合物;扣住,而不要切斷。
使用AFM樣品夾和膠水夾來固定薄箔樣品。
修塊質(zhì)量很重要,要使用適合低溫和室溫的修塊刀。
在冷凍過程中,要準備好處理可能比較棘手的波浪狀切片(準備好毛發(fā)、睫毛或粘在木棍上的達爾馬提亞狗毛發(fā))。
并不是所有的金剛石切片刀都是一樣的,請向您的供應商詢問干切實驗的兼容性(直接聯(lián)系 DIATOME 或通過您當?shù)氐?Leica 銷售專家)。
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UC Enuity超薄切片機
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